Fils unique de Richard et Mary Parker, Peter Parker devint orphelin à l'âge de six ans, lorsque ses parents furent tués tandis qu'ils travaillaient sous couverture pour le gouvernement. Parker fut donc laissé au soin de son oncle et de sa tante, Benjamin et May Parker, qui l'élevèrent comme l'enfant qu'ils n'avaient jamais eus. Peter était doué à l'école, et il montra très tôt une affinité pour les sciences qu'il maîtrisait parfaitement. Socialement, cependant, il était très introverti, et donc la cible de nombreuses avanies. Son oncle et sa tante compensèrent cela par un amour immuable, mais ils s'inquiétaient en secret de ce que Peter pouvait garder pour lui, étant donné sa fragilité émotionnelle et physique.
Un jour, à la suite d'une expérience à laquelle il assiste, il est mordu par une araignée radioactive. Cette morsure va lui conférer des super-pouvoirs : une force et une agilité hors du commun ainsi qu'un « sens d'araignée » l'avertissant des dangers imminents.
Dans un premier temps, Peter Parker va mettre à profit ses pouvoirs fraîchement acquis pour gagner de l'argent. Mais très vite, un drame va changer sa vie... Il va laisser un voleur s'échapper alors qu'il aurait pu très facilement l'arrêter, prétextant que ce n'est pas son problème. Peu de temps après, son oncle est tué par un cambrioleur. Ivre de colère, il se lance à la poursuite de l'assassin qui, une fois arrêté, se révèle être le voleur qu'il n'avait pas daigné appréhender. À partir de cet instant, sa vocation sera de lutter contre le crime et de suivre l'adage de son défunt oncle : « Un grand pouvoir implique de grandes responsabilités. »
Pour gagner de l'argent, subvenir à ses besoins, et à ceux de sa tante en plus de ses frais d'études, Peter doit rapidement trouver un travail. Possédant un appareil photo, il fait des photos de lui-même en tenue de Spider-Man, puis va les vendre a différents journaux. Il sera remarqué par J. Jonah Jameson, propriétaire et rédacteur en chef du Daily Bugle, dont les employés et les locaux joueront dorénavant un grand rôle dans sa carrière.
J. Jonah Jameson est l'archétype même de l'envieux : tous les super-héros sont à ses yeux au mieux des profiteurs de gloire, au pire des malfaiteurs qu'il faut démasquer aux yeux du public. Spider-Man sera sa cible préférée, pour ne pas dire unique. Et Peter Parker, en adolescent mal dans sa peau, aura bien du mal avec l'opinion publique, la police, ses petites amies, sa tante cardiaque et les criminels qu'il rencontrera pour ne pas dévoiler son identité.
En réalité, plusieurs personnes seront au courant de sa double identité.
Cinq de ses ennemis (Norman Osborn et Harry Osborn, le Caméléon, le Chacal, Venom) s'en serviront contre lui, au point de mettre sa famille en danger et de le faire douter de son identité.
Le docteur Octopus lui aussi connaîtra l'identité de Parker, mais par égard pour sa tante cherchera plutôt à lui venir en aide. Quant à Kraven, son code de l'honneur l'empêchera d'utiliser l'identité de son ennemi contre lui.
Mary-Jane est au courant depuis la première apparition de Spider-Man, mais elle mettra très longtemps à le lui dire, et plus à l'accepter.
Sa tante découvre son secret suite à son premier affrontement avec Morlun (elle trouve le costume en lambeaux dans son appartement). Elle mettra du temps à accepter la vie dangereuse de son neveu mais finira par l'épauler du mieux possible.
Dans ses alliés occasionnels, Daredevil le rencontrera plusieurs fois, mais ils évolueront toujours dans deux vies différentes, jusqu'à ce que Mysterio, ennemi de Spider-Man, s'acharne à détruire la vie de Daredevil.
Robbie Robertson et George Stacy sont sans aucun doute persuadés de la double identité de Peter Parker/Spider-Man, mais ils n'en auront jamais la moindre preuve, et le traiteront toujours comme un héros.
Le reporter Ben Urich (par ailleurs ami de Daredevil) a déduit la double identité de son collègue lors de la révélation de l'identité secrète de Matt Murdock dans les pages du Daily Globe, mais ne le lui avouera que pour les besoins d'une enquête.
De même, ses collègues les New Avengers sont tous au courant de son identité secrète.
Dans l'une des sagas les plus longues et controversées de l'histoire des comics, la Saga des Clones, la vie de Spider-Man fut bouleversée par l'irruption de ses clones, Ben Reilly et Kaine. Il crut même un moment être le clone et abandonna le costume de Spider-Man à Reilly. Finalement, Peter Parker récupéra le costume à la mort de Reilly, qui se révéla bien être un clone.
Avant Civil War, Peter Parker habitait avec sa femme Mary Jane et sa tante (après les incendies criminels qui ont ravagé son appartement et la maison de tante May) dans la Tour Stark, qui était aussi le QG des New Avengers, dont Spider-Man faisait partie (avec Captain America, Wolverine, Spider-Woman, Iron Man, Luke Cage et Sentry).
Durant Civil War, la vie de Spider-Man a changé à jamais car Peter a révélé son identité secrète au monde entier.
Reilly, Ben (clone, décédé)
May Parker (mère, décédée Annual Spider-Man #5)
Richard Parker (père, décédé, Annual Spider-Man #5)
Benjamin (Ben) Parker (oncle, décédé, Amazing Fantasy #15)
May Parker (née Reilly)tante, Amazing Fantasy #15)
Mary Jane Watson (femme, Amazing Spider-Man #42, [1])
Parker, May/Spider-Girl (fille, statut inconnu) surnommée "Mayday"
Ses amis et fréquentations
Liz Allen (amie de lycée, épouse de Harry Osborn [Amazing Fantasy 15])
Betty Brant (première petite amie, secrétaire de Jonah Jameson, veuve de Ned Leeds)
Ned Leeds (journaliste au Daily Bugle, époux de Betty Brant, décédé)
Harry Osborn (ami de fac, le deuxième Bouffon vert, décédé)
Norman Osborn (père de Harry, le premier Bouffon vert)
Gwen Stacy (petite amie, décédée)
George Stacy (père de Gwen, commissaire de police, décédé)
Eugène Thompson dit "Flash Thompson" (adversaire de lycée puis ami de fac [Amazing Fantasy 15])
J.Jonah Jameson (directeur du Daily Bugle [Amazing Spider-Man 1]) [2]
Joe "Robbie" Robertson (rédacteur en chef du Daily Bugle [Amazing Spider-Man 51])
Spider-Woman I (Jessica Drew), II (Julia Carpenter), III (Martha Franklin), IV
La Chatte Noire (ancienne petite amie, ex-cambrioleuse devenue détective)
Ses alliés
Bruce Banner/Hulk
Les X-Men dont surtout le Fauve et Wolverine
Nick Fury
Les New Avengers:
Spider-Woman (Jessica Drew),
Docteur Strange
Ronin
Iron Fist
Luke Cage
Ronin
Wolverine
Les Quatre Fantastiques
Toxin
La Chatte Noire
Le Dr Connors (Le Lézard)
Captain America
